生物危害性样本细胞分选的不二之选 ——MACSQuant Tyto
发布时间：2023-06-14点击：1026
液滴式（droplet）流式分选已经成为免疫学家们对免疫细胞进行分选的重要工具，促进了生物领域的快速发展。然而，液滴式流式细胞仪有局限性。首先，分选对细胞造成一定程度的损失；其次，分选时间受到目的细胞群的数量的影响，限制对目的细胞的额外分析，最重要的是分选过程有产生气溶胶的潜在风险。
Holmes等人提供了当前国际流式细胞术在所有生物安全标准分选有生物危害性样本的指南[1]。危害等级Ⅲ（RG3）的高危病原体，如：土拉热弗朗西斯菌(Francisella tularensis)、结核杆菌（Mycobacterium tuberculosis）、鼠疫杆菌（Yersinia pestis）以及急性呼吸综合征冠状病毒，要求在生物安全3级实验室操作。因为这些病原体的主要风险之一是在操作者实验操作过程中产生的气溶胶有引发肺部感染的可能。液滴式分选设备通过放置在生物安全柜中，来降低传染性样本的潜在风险。但是对于需要高纯度样本的实验室来说，产生气溶胶的潜在风险仍然是一个不可逾越的问题。
BSL-3实验室环境中的细胞分选应满足以下标准：
1.分选过程应该产生有限或者完全不产生气溶胶，并保证是安全的。
2.分选过程保证少的细胞损失或无细胞损失，分选过程是有效的
3.可实现多参数细胞分选，以增加对目的细胞的识别
4.保证无菌分选，设备易于使用和维护[2]
在过去的几十年里，特异性免疫细胞群的分选和下游分析一直是免疫学研究的重要组成部分。基于液滴式流式分选的不断发展，包括额外的激光器和检测通道，允许用户对越来越多的荧光参数进行分选。尽管分选技术随着时间的推移而改进，但有一个特征保持不变——分选过程中产生具有传染潜力的气溶胶的危险。这个小而重要的特征通常排除了在密闭实验室中使用液滴式流式分选设备。一些研究小组绕过了这一障碍，将仪器放置在定制的、昂贵的大型生物安全柜中。然而，考虑到它们的费用和占地面积，这通常不是大多数研究RG3或4病原体的研究所的选择。
2017年德国美天旎公司发布了第一款基于微芯片技术，利用空气压力对细胞进行分选的流式细胞分选仪——MACSQuant® Tyto®，一款突破传统液滴式细胞分选的设备，仪器本身没有任何流体和管道系统，分选舱是全封闭的一次性无菌实验耗材，因此没有残留污染的风险。更重要的是，分选过程没有气溶胶形成，满足了所有BSL3实验室分选样本的要求。
亮点1：温和
• 低压力
• 无需减压
• 细胞无刺激活化
• 细胞无损失
亮点2：无菌
• 全封闭分选舱
• 无交叉污染
• 无液路污染
亮点3：安全
• 无气溶胶和液滴产生
• 无需生物安全柜
亮点4：简单
• 台式机，体积小
• 无需调节液路延迟
• 无需校准激光
• 无需液路清洗
[1] Holmes KL, Fontes B, Hogarth P, et al. International Society for the Advancement of Cytometry cell sorter biosafety standards. Cytometry A. 2014;85(5):434-453. doi:10.1002/cyto.a.22454
[2] Roberts LM, Anderson R, Carmody A, Bosio CM. Validation and Application of a Benchtop Cell Sorter in a Biosafety Level 3 Containment Setting. Appl Biosaf. 2021;26(4):205-209. doi:10.1089/apb.20.0065
原创作者 | Yuanyuan Liu
